รายงานวิจัยฉบับสมบูรณ์ โครงการวิจัย ผลของเมลาโทนินในการเพิ่มคุณสมบัติของเซลล์ต้นกำเนิดของเซลล์คีราติโนไซด์

Abstract

รายงานการวิจัย เรื่อง ผลของเมลาโทนินในการเพิ่มคุณสมบัติของเซลล์ต้นกำเนิดของเซลล์คีราติโนไซด์ เป็นการวิจัยทางห้องปฏิบัติการ (in-vitro) เพื่อศึกษาฤทธิ์และกลไกการออกฤทธิ์ของสารเมลาโทนิน ในการเพิ่มคุณสมบัติของเซลล์ต้นกำเนิดของเซลล์คีราติโนไซด์ งานวิจัยนี้ทำการศึกษาในเซลล์ไลน์ผิวหนังชนิดเซลล์คีราติโนไซด์ (HaCaT) และไฟโบรบลาสต์ โดยทำการทดสอบความเป็นพิษของสารเมลาโทนินต่อเซลล์ผิวหนังชนิดคีราติโนไซด์และไฟโบรบลาสต์ โดยวิธี MTT ทดสอบการตายของเซลล์แบบอะพอพโตซิสโดยการย้อมสี acridine orange และ propidium iodide หลังจากนั้นเลือกความเข้มข้นที่ไม่เป็นพิษต่อเซลล์มาทำการทดสอบต่อในเซลล์ต้นกำเนิดผิวหนังชนิดฮาแคท โดยทดสอบการเคลื่อนที่ของเซลล์โดยวิธี scratch wound healing ทดสอบการเพิ่มจำนวนในสภาวะไร้การยึดเกาะ (spheroid formation) ตรวจวิเคราะห์ระดับ stem cell markers (CD133) ระดับ self-renewal transcription factor (Nanog) และตรวจวิเคราะห์ upstream pathway ที่เกี่ยวข้อง (-catenin และ AKT) ด้วย Western blotting ทั้งยังศึกษาฤทธิ์ในการปกป้องการตายของเซลล์จาก hydrogen peroxide ด้วย ผลการวิจัย พบว่าสารเมลาโทนินที่ความเข้มข้นที่ไม่มีพิษต่อเซลล์ผิวหนังทั้ง 2 ชนิด (0.5 – 10 µM) เพิ่มการเคลื่อนที่ของเซลล์ฮาแคท และเพิ่มจำนวนสเฟียรอยด์ เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มที่ไม่ได้รับสารเมลาโทนิน โดยเพิ่มการแสดงออกของโปรตีน CD133, Nanog, -catenin และ p-AKT/AKT รวมไปถึงปกป้องการตายของเซลล์จาก hydrogen peroxide ได้อีกด้วย โดยสรุป สารเมลาโทนินเพิ่มคุณสมบัติความเป็นเซลล์ต้นกำเนิดของเซลล์ผิวหนังชนิดคีราติโนไซด์ได้ โดยผ่านการส่งสัญญาณของ -catenin/AKT pathway จากข้อมูลที่ได้ สารเมลาโทนินจึงเหมาะที่จะนำไปพัฒนาสำหรับใช้ในเวชสำอางเพื่อลดริ้วรอย สำหรับชะลอความแก่